天根生化科技(北京)有限公司

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HRM分析试剂盒 (EvaGreen)

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货号:FP210-02

规格:20µl×500次

品牌:TIANGEN(生产)   区域:全国

交货周期:现货

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产品简介

本产品结合了饱和染料EvaGreen和抗体酶的优点,是一款适用于高分辨率熔解曲线(High Resolution MeltingHRM)分析的专业试剂盒。本品是一种2× PreMixPCR反应液配制十分简单方便;具有分辨率高和模板高度适应性等特点。

SYBR Green不同,EvaGreen在高浓度情况下不会抑制PCR反应;可以使双链PCR产物的结合量达到饱和状态,所以称为饱和染料。不会产生SYBR Green 染料重排现象,能够很好的区分扩增产物之间单个碱基的差异。

本产品可用于已知SNP分析,以及未知突变基因扫描和甲基化PCR分析等研究。

试剂盒特点

1. HRM Analysis PreMix采用了抗体修饰的热启动DNA聚合酶,配合精心优化Buffer体系,具有高扩增效率,高扩增特异性和宽广的可信范围的特点。

2. HRM Mix中预混有Eva Green饱和染料,其在饱和状态下具很高的熔解曲线分辨率,可以区分单个碱基的变异。

3. 该产品独特的Buffer体系进一步增加了熔解曲线的稳定性,提高扩增的特异性。

4. 本产品附带ROX Reference Dye,用于消除信号本底以及校正孔与孔之间产生的荧光信号误差,方便客户针对不同型号荧光定量PCR仪时选择对应浓度使用。

储存条件

收到本产品后, 请立即置于-20 避光保存。从-20 取出使用时, 将冻存的2x HRM Analysis PreMix50×ROX Reference Dye溶解,然后轻轻颠倒混匀,待溶液完全均一后再行使用。如解冻后没有使用,须彻底混匀后重新冷冻(在解冻过程中盐会出现分层现象,未混匀进行冷冻,盐晶体的析出将会对酶造成损害)。如需一段时间内经常取用,可在28条件下储存3个月。避免反复多次冻融。

注意事项

1.本产品中含有荧光染料EvaGreen,保存本产品或配制PCR反应液时应避免强光照射。

2.如果试剂没有混匀,其反应性能会有所下降。使用时请上下颠倒轻轻混匀,请不要使用振荡器进行混匀,尽量避免出现泡沫,并经瞬时离心后使用。

3.引物纯度对反应特异性影响很大,建议使用PAGE级别以上纯化的引物。

420 μl反应体系中,基因组DNA模板的使用量一般小于100 ng,并尽量保持不同反应之间有相同的模 量。模板纯度,OD260/280 1.6~2.0OD260/230 1.5~2.0

5.由于HRM具有很高的灵敏性,因此在条件允许的情况下推荐使用50 ul反应体系,大的反应体系可以提高反应重复性,减少实验误差对熔解曲线的负面影响。

6.引物设计:较短的PCR产物可以提高HRM的分辨率;因此在设计PCR引物时,遵循普遍的原则外,尽量保持产物长度在80~120之间。SNP位点尽量处在PCR产物序列中间位置。

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2017/1/12 18:29:39评论人:zhaoxin | 中国农业科学院蔬菜花卉研究所

HRM分析试剂盒 (EvaGreen)好评

很好

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